pcr核酸檢測(cè)是什么意思 方法及步驟
導(dǎo)讀:pcr核酸檢測(cè)是什么意思 方法及步驟 pcr核酸檢測(cè)是什么意思 pcr核酸檢測(cè)方法與步驟 核酸是什么 核酸檢測(cè)是什么 假陽性與假陰性 沈陽PCR核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室
核酸檢測(cè)是目前全球用來對(duì)是否攜帶新冠病毒進(jìn)行確定的一種有效方式。目前大家主要使用的是鼻拭子、咽拭子以及抗體血清lgm進(jìn)行參考。但是根據(jù)最新的新加坡入境要求是進(jìn)行pcr核酸檢測(cè),那么pcr核酸檢測(cè)是什么意思呢?
pcr核酸檢測(cè)是什么意思
PCR的意思是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),能夠用來擴(kuò)增DNA,從而將微量的DNA擴(kuò)增到能夠檢測(cè)的程度。有些病毒的核酸是DNA,需要采用這個(gè)方法進(jìn)行檢測(cè)。所以PCR并不是進(jìn)行的檢查,而是檢測(cè)DNA的一種方法。比如乙肝病毒DNA定量,用的就是這一種方法。檢查DNA的目的,一方面是可以診斷疾病,如果連病原體的DNA都能檢測(cè)到,就說明感染了這種病原體;另一方面是判斷病毒復(fù)制的多少,從而判斷病情嚴(yán)重程度或者治療效果。
pcr核酸檢測(cè)方法與步驟
進(jìn)行核酸檢驗(yàn),需要經(jīng)過取樣、留樣、留存、核酸提取、上機(jī)檢測(cè)五個(gè)步驟。
核酸檢測(cè)的第一步就是采集人體分泌物,用鼻試子或咽試子擦拭鼻腔或咽后壁及雙側(cè)咽扁桃體處。
第二步醫(yī)務(wù)人員進(jìn)行留樣,將試子頭浸入細(xì)胞保存液中,折斷尾部后立即旋緊管蓋。
第三部要將樣本放入密閉袋中,保存好并及時(shí)送檢。
第四步將樣本送進(jìn)實(shí)驗(yàn)室,提取核酸。
第五步,將提取物進(jìn)行熒光PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
核酸是什么
核酸(nucleic acid),是一類由核苷酸(nucleotide)構(gòu)成的生物大分子,分為核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)和脫氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)兩類,其中RNA多為單鏈結(jié)構(gòu),DNA多為雙鏈結(jié)構(gòu)。除朊病毒(prion)外,核酸是構(gòu)成生命所必需的生物大分子,其主要作用是構(gòu)成生命體的遺傳信息載體,除此之外,還有部分核酸可作為及參與構(gòu)成具有生物活性的酶分子或其他分子機(jī)器 。
核酸檢測(cè)是什么
核酸檢測(cè)顧名思義就是針對(duì)核酸開展檢測(cè)。
核酸檢測(cè)有何獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)呢?為何能作為新冠病毒確診的“金標(biāo)準(zhǔn)”呢?
其實(shí)每一種檢測(cè)方法都有其擅長(zhǎng)的應(yīng)用場(chǎng)景。以病毒檢測(cè)為例,通常的免疫學(xué)檢測(cè)方法(膠體金、ELISA、化學(xué)發(fā)光等)的檢測(cè)對(duì)象是病毒的抗原或抗體,相當(dāng)于“側(cè)面描繪”。由于從感染到可檢測(cè)存在一個(gè)時(shí)間窗口期,因此免疫學(xué)檢測(cè)方法一般不合適作為早期診斷。
假陽性與假陰性
1、假陽性
假陽性通常比較少。一般實(shí)驗(yàn)室人員操作不當(dāng)會(huì)導(dǎo)致樣本間交叉污染或擴(kuò)增產(chǎn)物的遺留污染,該種情況下可能會(huì)導(dǎo)致假陽性。
不過假陽性可以通過嚴(yán)格控制檢測(cè)流程、以及執(zhí)行若干個(gè)陰性樣本隨機(jī)參與檢測(cè)的策略而有效規(guī)避。
2、假陰性
在這里需要說明的是,PCR檢測(cè)的假陰性與臨床的假陰性實(shí)際上不是一個(gè)概念。
以網(wǎng)絡(luò)上激烈討論的新冠病毒的診斷為例,臨床假陰性是指臨床癥狀和影像學(xué)高度疑似被感染、但PCR檢測(cè)卻多次或始終為陰性的情況;而PCR檢測(cè)假陰性是指所采集樣本中存在足夠量的新型冠狀病毒但卻沒有檢出的情況。
避免核酸檢測(cè)的假陰性,主要需要解決:(1)被感染者的細(xì)胞中有足量的病毒、(2)采集樣本中可以采集到含有病毒的細(xì)胞、以及(3)檢測(cè)出樣本中的病毒這三個(gè)環(huán)節(jié)。
其中PCR試劑盒的技術(shù)參數(shù)優(yōu)劣主要影響第三個(gè)檢測(cè)環(huán)節(jié)。
僅針對(duì)第三個(gè)檢測(cè)環(huán)節(jié),若樣本中病毒數(shù)量低于一個(gè)程度(低于最低檢測(cè)限),PCR試劑盒就無法檢出。從這個(gè)角度看,PCR檢測(cè)的假陰性是無法完全避免的。這也是為何需要補(bǔ)充開發(fā)病毒的特異抗體檢測(cè)的原因所在。
沈陽PCR核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室
實(shí)驗(yàn)室建設(shè)堅(jiān)持高標(biāo)準(zhǔn)、嚴(yán)要求,嚴(yán)格按照國(guó)家《醫(yī)學(xué)生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)》進(jìn)行建設(shè),建設(shè)面積100余平方米,分為試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備與提取區(qū)、擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)三個(gè)區(qū)域。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)配置全自動(dòng)核酸提取儀、實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀、擴(kuò)增儀、高壓滅菌器、B2型生物安全柜、超凈工作臺(tái)、超低溫冰箱等儀器,消毒和防護(hù)設(shè)施齊全,符合相關(guān)生物實(shí)驗(yàn)室安全標(biāo)準(zhǔn)。為防止實(shí)驗(yàn)室外的區(qū)域被污染,實(shí)驗(yàn)室的氣壓均為負(fù)壓,有效降低感染風(fēng)險(xiǎn)。此外,實(shí)驗(yàn)室配備了污水處理系統(tǒng),達(dá)到了廢液的合理排放和處理。
*目前我國(guó)多地區(qū)建設(shè)了PCR核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室用以進(jìn)行新冠病毒核酸檢測(cè)
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